摘要
目的探究白念珠菌anillin家族蛋白Int1对septin细胞骨架组织的调控。方法构建白念珠菌Int1蛋白的全长及截短的系列片段质粒, 使其与绿色荧光蛋白(GFP)融合表达, 通过荧光显微镜观察其胞内定位, 鉴定Int1中介导芽颈定位的区域。在模式生物酿酒酵母细胞中, 对Int1全长及片段进行过量表达, 观察其对细胞生长、细胞形态和septin组织的影响, 从而确定Int1中介导与septin相互作用, 发挥主要生物学效应的功能区段, 研究这一区段与septin的共定位。结果 Int1全长1 661个氨基酸残基, 鉴定出一段仅含有209个氨基酸的中间区段Int1-M4(739~947 aa), 在小芽和大芽时期均可以定位在芽颈。过量表达Int1-M4导致细胞产生显著的生长缺陷、芽体变长的细胞形态和septin组织絮乱。在芽体变长的细胞中, Int1-M4与异常的septin结构存在明显共定位。结论 Int1中一段仅含有209个氨基酸的中间区段Int1-M4(739~947 aa)介导了其芽颈定位和与septin的相互作用, 在调控septin组织过程中发挥重要功能。
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单位华中科技大学同济医学院