模拟炎症性缺氧微环境研究葛根芩连汤抑制巨噬细胞M1极化的效应及作用机制

作者：胡佳; 刘红宁; 尚广彬; 李冰涛; 严小军^*

来源：中国中药杂志, 2024, 1-9.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20240205.701

• 葛根芩连汤
• 溃疡性结肠炎
• 炎症性缺氧微环境
• 巨噬细胞极化

体外模拟肠道缺氧微环境探索葛根芩连汤(GQD)抑制炎症性缺氧下巨噬细胞M1极化的效应及作用机制。利用三气培养箱模拟结肠正常生理性缺氧和溃疡性结肠炎(UC)炎症性缺氧微环境，将RAW264.7巨噬细胞分为18.5% O2(常氧组)、4% O2(生理性缺氧)、1% O2(炎症性缺氧)，脂多糖(LPS)诱导24 h，流式细胞术检测M1极化情况。在1%炎症性缺氧条件下分为空白组、模型组、葛根芩连汤含药血清低、中、高剂量组，流式细胞术检测M1极化标志物CD86，ELISA法检测细胞上清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达；qRT-PCR检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、TNF-α、IL-1β mRNA表达；Western blot检测HIF-1α/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路相关蛋白表达情况；免疫荧光法检测NF-κB p65入核情况。结果表明，1% O2组CD86阳性率最显著；1%炎症性缺氧条件下，与空白组相比，模型组CD86、TNF-α、IL-1β、HIF-1α表达升高，与模型组比较，GQD各剂量组能降低CD86、TNF-α、IL-1β、HIF-1α表达。与空白组比较，模型组HIF-1α、NF-κB p65、p-IKKα/β、p-IκBα蛋白表达升高；与模型组比，GQD各组HIF-1α、NF-κB p65、p-IKKα/β、p-IκBα蛋白表达明显降低。与空白组比较，模型组NF-κB p65入核明显；与模型组比较，GQD各剂量组显著降低NF-κB p65入核表达。研究表明1%炎症性缺氧条件下GQD可能通过下调HIF-1α/NF-κB 信号通路抑制M1巨噬细胞极化及相关炎症因子分泌发挥保护肠道作用。

• 单位
  江西省中医病因生物学重点实验室; 江西中医药大学; 江西中医药大学附属医院