紫花前胡素能降低大鼠肾小管上皮细胞活性氧并抑制顺铂诱导的细胞凋亡

作者：李翠琼; 李健春; 樊均明; 孟立锋; 曹灵

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2017, 33(10): 1328-1334.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.008449

• 紫花前胡素
• 顺铂
• NRK-52E细胞
• 氧化应激
• 细胞凋亡

目的研究紫花前胡素抑制顺铂诱导的NRK-52E正常大鼠肾小管上皮细胞凋亡的作用机制。方法先采用CCK-8法检测(0、10、20、40、80、100、150、200)μmol/L紫花前胡素、(0、5、10、20、30、40、50)μg/mL顺铂处理24 h对细胞增殖的影响,确定最佳处理剂量;而后采用20μg/mL顺铂联合(10、50、100)μmol/L紫花前胡素刺激NRK-52E细胞,CCK-8法检测对细胞活力的影响。细胞分为正常对照组、20μg/mL顺铂刺激组、(10、50、100)μmol/L紫花前胡素处理组。倒置相差显微镜观察细胞形态改变,4,6-二氨基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察细胞核形态改变,流式细胞术检测细胞凋亡水平,二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色检测细胞内活性氧(ROS)改变,Western blot法检测细胞凋亡标志蛋白裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、裂解型多腺苷二磷酸核糖聚合酶(c-PARP)的蛋白水平。结果与正常对照组相比,顺铂能显著抑制细胞活性,其半数抑制浓度(IC50)约为20μg/mL;与模型组比较,紫花前胡素预处理后,细胞内ROS水平显著降低,c-caspase-3、c-PARP蛋白水平降低,细胞凋亡减少。结论紫花前胡素能降低NRK-52E细胞ROS水平并抑制顺铂诱导的NRK-52E细胞凋亡。

• 单位
  四川大学华西医院; 生物治疗国家重点实验室; 西南医科大学; 广西中医药大学第一附属医院