辐射诱导乏氧HeLa细胞HIF-1α和DNA-PK相互调控机制的研究

作者：熊华; 于世英; 袁响林; 邹燕梅; 庄亮

来源：华中科技大学学报(医学版), 2008, 37(06): 764-768+841.

• 辐射
• DNA依赖蛋白激酶
• 乏氧诱导因子-1α
• 乏氧

目的初步探讨辐射效应诱导下乏氧人宫颈癌细胞系HeLa细胞乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)和DNA依赖蛋白激酶(DNA-PK)表达相关性及其调控机制。方法免疫印迹法检测乏氧状态下HeLa细胞接受射线照射后HIF-1α和DNA-PK(包括DNA-PKcs及Ku80)表达情况;运用靶向抑制HIF-1α或DNA-PKcs的小发卡样干扰RNA(shRNA)表达质粒分别转染乏氧HeLa细胞,经辐射诱导后检测不同时间点各自DNA-PKcs或HIF-1α表达的变化。结果乏氧HeLa细胞经辐射诱导后0、12、24、48h时间点检测到HIF-1α、DNA-PKcs和Ku80表达随时间增加逐渐增高,其中HIF-1α和DNA-PKcs的相对表达量呈正相关(r=0.816,P=0.041);运用HIF-1α-shRNA表达质粒明显抑制乏氧HeLa细胞内HIF-1α表达,检测到细胞经照射后12、24、48h时间点DNA-PKcs的表达与转染空白质粒的阴性对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05);而pDNA-PKcs-shRNA表达质粒抑制DNA-PKcs表达后检测各时间点HIF-1α的表达与转染空白质粒的阴性对照组相比均明显减少(P<0.05)。结论辐射诱导乏氧HeLa细胞内HIF-1α表达与DNA-PKcs的表达水平相关;通过抑制DNA-PKcs的表达能显著降低乏氧HeLa细胞HIF-1α表达水平,对HIF-1α的调控机制提出新的思路。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院