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摘要
目的 探究氯化两面针碱(nitidine chloride, NC)对宫颈癌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 以宫颈癌细胞系HeLa及SiHa为对象，通过CCK-8法和克隆形成实验检测NC的细胞毒性作用及对细胞生长的抑制作用。通过TUNEL法检测NC对宫颈癌细胞凋亡的影响，并采用Western blot法检测凋亡相关蛋白表达情况。运用免疫共沉淀实验、泛素化实验及Western blot实验分析NC对宫颈癌细胞中p53与E6AP蛋白相互作用、p53泛素化修饰水平、p53蛋白稳定性的影响。结果 NC可明显抑制宫颈癌细胞增殖、诱导宫颈癌细胞凋亡，可抑制宫颈癌细胞中抑癌蛋白p53与泛素蛋白连接酶E6AP相互作用，降低p53泛素化修饰水平，延缓p53降解，增加p53蛋白表达水平。结论 NC可通过抑制p53泛素化降解，提升p53蛋白表达水平，恢复其抑癌功能，发挥抗宫颈癌作用。
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