虾夷马粪海胆XIAP基因克隆及不同病原微生物刺激后的表达响应

作者：刘圣美; 尚凤芹; 陈亚东; 常亚青; 王秀利; 仇雪梅; 刘洋

来源：大连海洋大学学报, 2022, 1-13.

DOI：10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-303

• 虾夷马粪海胆
• SiXIAP
• RACE
• 实时荧光定量PCR

为了研究X染色体连锁凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis protein，XIAP）在虾夷马粪海胆Strongylocentrotus intermedius天然免疫系统中的作用，采用cDNA末端快速扩增（RACE）技术克隆获得一条虾夷马粪海胆SiXIAP基因的cDNA序列，并通过实时定量PCR分析了其在各组织中的分布及经脂多糖（Lipopolysaccharide， LPS）、肽聚糖（Peptidoglycan ， PGN）、聚肌胞苷酸（Polyinosinic-polycytidylic acid， poly I: C）、强壮弧菌（Vibrio fortis， V. fortis）和葡聚糖（Whole glucan particles， WGP）刺激后SiXIAP基因在体腔细胞中的表达情况。结果表明：SiXIAP的cDNA长为4894 bp，其中5′-UTR为459 bp，开放阅读框为2331 bp，3′-UTR为2104 bp，总共编码776个氨基酸，具有3个BIR结构域和1个RING指环结构域，预测相对分子质量为8696，等电点为5.96，为酸性蛋白；SiXIAP在检测的各组织中均有表达，在卵巢中的表达量显著高于管足、体腔细胞、围口膜、肠和精巢（P<0.05）；经肽聚糖、脂多糖、聚肌胞苷酸、葡聚糖和强壮弧菌刺激后，体腔细胞中的SiXIAP基因表达量显著上升（P<0.05），肽聚糖、脂多糖和聚肌胞苷酸刺激后12 h达到最高值；葡聚糖刺激后24 h达到最高值，强壮弧菌刺激后6 h就达到最高值。研究表明，克隆获得的SiXIAP基因参与了虾夷马粪海胆的免疫应答，并在海胆的天然免疫中发挥重要作用。

• 单位
  大连海洋大学; 农业部