A152G突变对GH43家族麦氏交替单胞菌木聚糖酶XynZT-2的影响

作者：徐佳; 高廷; 杨彦博; 刘永辉; 田艳杰; 崔彩霞; 郭长江^*; 周晨妍^*

来源：食品与发酵工业, 2022, 48(03): 50-55.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.028331

• 麦氏交替单胞菌
• 木聚糖酶
• 保守位点
• 定点突变
• 酶学性质

前期研究发现GH43家族近缘物种相同位点存在天然突变。为了探究保守位点区域的基因突变对酶催化性能的影响，对来源于麦氏交替单胞菌(Alteromonas macleodii)的木聚糖酶XynZT-2利用软件计算、随机突变及天然存在的突变进行分子改造，定点突变第152位丙氨酸为甘氨酸(A152G),将原酶与突变酶基因转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行异源表达。酶学性质比较发现，突变酶XynZT-2A152G最适温度为55℃,相比原酶XynZT-2提高了10℃;突变酶XynZT-2A152G最适pH为7.0,而原酶XynZT-2最适pH为6.0,突变酶最适pH更偏中性；突变酶XynZT-2A152G在pH 3.0～9.0均保持80%以上相对酶活力，原酶仅在pH 3.0～7.0有80%以上相对酶活力，在碱性环境中，突变酶比原酶pH稳定性更好。定点突变A152G后，对酶的最适温度和pH稳定性均有显著影响。该研究为进一步了解GH43家族木聚糖酶的构效关系奠定了基础。

• 单位
  新乡医学院; 新乡医学院三全学院; 生命科学技术学院