YAP/OPA1信号通路在丙泊酚减轻小鼠海马神经元氧糖剥夺-复氧复糖损伤中的作用

作者：王泽华; 马晓燕; 喻文立^*

来源：中华麻醉学杂志, 2023, 43(08).

• 二异丙酚
• 神经元
• 再灌注损伤
• Yes相关蛋白
• 视神经萎缩蛋白1

目的评价Yes相关蛋白(YAP)/视神经萎缩蛋白1(OPA1)信号通路在丙泊酚减轻小鼠海马神经元氧糖剥夺-复氧复糖损伤中的作用。方法取正常培养处于对数生长期的HT22小鼠海马神经元, 采用随机数字表法分为4组(n=54):对照组(C组)、氧糖剥夺-复氧复糖组(OGD/R组)、丙泊酚组(P组)和丙泊酚+YAP沉默组(P+ siRNA-YAP组)。采用无糖无氧孵育6 h、复氧复糖培养24 h的方法制备神经元氧糖剥夺-复氧复糖损伤模型。P组于复氧复糖即刻加入丙泊酚终浓度50 μmol/L。P+ siRNA-YAP组于模型制备前48 h转染siRNA-YAP。采用CCK-8法检测神经元活力, 采用流式细胞术检测ROS含量和凋亡率, 采用分光光度法检测MDA含量、SOD活性以及线粒体膜电位(MMP), 采用荧光素荧光酶发光法检测线粒体ATP含量, 采用免疫荧光法观察YAP核转位, Western blot法检测YAP、磷酸化YAP(p-YAP)以及OPA1的表达。结果与C组比较, OGD/R组神经元活力降低, ROS、MDA含量和凋亡率升高, SOD活性、MMP和线粒体ATP含量降低, p-YAP表达上调, OPA1表达下调(P<0.05), 核内YAP荧光强度减弱;与OGD/R组比较, P组神经元活力升高, ROS、MDA含量和凋亡率降低, SOD活性、MMP和线粒体ATP含量升高, p-YAP表达下调, OPA1表达上调(P<0.05), 核内YAP荧光强度增强;与P组比较, P+siRNA-YAP组神经元活力降低, ROS、MDA含量和凋亡率升高, SOD活性、MMP和线粒体ATP含量降低, p-YAP、YAP和OPA1表达下调(P<0.05), 核内YAP荧光强度减弱。结论丙泊酚减轻小鼠海马神经元氧糖剥夺-复氧复糖损伤的机制可能与激活YAP/OPA1信号通路有关。

• 单位
  天津市第一中心医院; 长治医学院