白木香AsMYC2基因全长cDNA克隆及伤害诱导表达分析

作者：廖永翠; 魏建和; 吕菲菲; 马广强; 杨中杰

来源：中国药学杂志, 2021, 56(15): 1203-1209.

DOI：10.11669/cpj.2021.15.003

• 白木香
• AsMYC2基因
• cDNA快速末端扩增
• 表达分析

目的克隆国产沉香基原植物白木香[Aquilaria sinensis(Lour.) Gilg]茉莉酸(JA)信号途径核心转录因子基因(MYC2),为深入研究其在沉香倍半萜合成途径中的功能奠定基础。方法以白木香总RNA为模板,采用RACE法和RT-PCR方法,克隆MYC2基因cDNA全长,并进行生物信息学分析;采用实时荧光定量(qRT-PCR)方法分析经茉莉酸甲酯(MeJA)、机械伤害处理的白木香愈伤组织,以及加热和MeJA处理的白木香悬浮细胞中MYC2基因的表达模式。结果白木香MYC2基因全长cDNA为2 452 bp,命名为AsMYC2,GenBank登录号为KP677282。序列分析表明,该基因包含1个2 022 bp的开放阅读框,编码673个氨基酸,蛋白质相对分子质量为73 503,等电点为5.53。qRT-PCR结果显示,AsMYC2基因在经MeJA和机械伤害处理的愈伤组织中,以及热激和MeJA处理的悬浮细胞中,均在处理4 h后其相对表达量最高,随后逐渐降低,到24 h时基本恢复正常。结论实验结果表明,AsMYC2基因对伤害诱导极具敏感,且能在伤害早期响应,属于伤害诱导表达的早期基因。

• 单位
  江西中医药大学; 中国医学科学院药用植物研究所; 生命科学学院