嗜肺军团菌flaA部分基因的克隆及其原核表达

作者：刘阳; 曹秀琴; 杨志伟

来源：宁夏医科大学学报, 2011, (03): 206-209.

DOI：10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2011.03.001

• 嗜肺军团菌
• 鞭毛亚单位蛋白
• 表达
• 纯化 legionella pneumophila
• FLA protein
• expression
• purification

目的克隆表达嗜肺军团菌的鞭毛亚单位蛋白flaA部分基因,并纯化重组蛋白。方法以嗜肺军团菌I型DNA为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增鞭毛亚单位蛋白flaA部分基因,并将其定向克隆至原核表达载体pET32a(+),构建原核表达重组质粒pET-flaA。经PCR和限制性核酸内切酶鉴定及测序分析后,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE电泳分析,用亲和层析法纯化其表达蛋白。结果扩增出嗜肺军团菌606bp的flaA部分基因,构建的重组质粒pET-flaA表达并纯化出42 kDa融合蛋白质。结论成功构建嗜肺军团菌flaA部分基因的原核表达载体,在原核系统中得到了高效表达。

• 单位
  生育力保持省部共建教育部重点实验室