摘要
目的 探索玻璃化超低温过程中不同预处理和PVS2处理时间两个关键环节对留兰香再生植株遗传稳定性的影响,为植物种质资源超低温保存提供理论依据。方法 使用改良CTAB法提取留兰香超低温再生植株DNA,用16条引物分别对不同预处理和不同PVS2处理后的35株留兰香超低温再生植株DNA进行ISSR-PCR扩增检测。结果 不同浓度蔗糖和预处理时间,共扩增出3465条带,均未检测到变异条带;不同PVS2处理时间,共扩增出条带1776条,也未出现变异条带。形态学指标测定结果表明,超低温保存再生植株的株高、茎粗、主茎叶片数、节间数、叶片色及叶片数均未发生变异。结论 一定范围内高浓度蔗糖预处理和不同PVS2处理时间不会引起超低温保存再生植株产生变异,留兰香的超低温再生植株具有遗传稳定性,玻璃化超低温保存可作为一种留兰香优良种质资源保存的方法。
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