家蚕抗菌肽CD高效表达及其抗BmNPV感染作用

作者：李伟灿; 孟小林; 徐进平; 王健; 鲁伟; 徐智圣

来源：Virologica Sinica, 2006, (06): 589-593.

• 抗菌肽
• 活性表达
• 抗BmNPV感染 Antimicrobial peptide
• Expression
• Anti-infection to BmNPV

通过大肠杆菌JM109诱导家蚕,提取其脂肪体总mRNA后,通过RT-PCR得到cDNA,根据GenBank上家蚕抗菌肽CecropinD的cDNA序列,设计并合成引物,然后PCR扩增得到CecropinD肽基因并克隆到pGEM-T载体中,经过EcoRΙ和XhoI酶切,连接并将CecropinD肽基因插入pET32a表达载体中。用重组质粒pET32a-ecropinD转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下,融合蛋白Trx-CecropinD以可溶形式得到高效表达,经SDS-PAGE检测显示分子量为23kDa与预期大小相符,表达量约为总蛋白的30%。融合蛋白经Ni2+柱纯化后通过肠激酶切...

• 单位
  武汉大学; 生命科学学院; 病毒学国家重点实验室