摘要
目的探讨蜕皮甾酮(EDS)对紫外线(UV)诱导人晶状体上皮细胞(HLE-B3)凋亡的影响。方法体外常规培养HLE-B3细胞,细胞计数试剂盒法检测蜕皮甾酮对HLE-B3细胞增殖活力的影响;UV照射HLE-B3细胞建立损伤模型,分组为空白对照组,EDS高剂量组(UV+1.5μmol/L EDS),EDS中剂量组(UV+1.0μmol/L EDS),EDS低剂量组(UV+0.5μmol/L EDS),UV组;流式细胞仪检测HLE-B3细胞凋亡率;RT-PCR法检测HLE-B3细胞内Bax、Bcl-2及Caspase-3基因的表达;采用Western印迹检测HLE-B3细胞内Bax、Bcl-2、酶切Caspase-3蛋白表达。结果所选浓度EDS对HLE-B3细胞增殖活性无明显影响;流式细胞仪结果显示经UV辐射后的HLE-B3细胞凋亡率明显增高,但经过不同浓度的EDS处理后,HLE-B3细胞凋亡率明显下降;与空白对照组相比,UV组HLE-B3细胞Bax和酶切Caspase-3的表达明显增高,而Bcl-2蛋白水平显著下降(P<0.05)。与UV组比较,不同剂量EDS组HLE-B3细胞Bcl-2蛋白水平显著上升,而Bax和酶切Caspase-3蛋白水平显著下降(P<0.05);与空白对照组相比,UV组HLE-B3细胞Bax mRNA和Caspase-3 mRNA水平显著上升,而Bcl-2 mRNA水平显著下降(P<0.05)。与UV组比较,采用不同浓度的EDS作用后,细胞Bcl-2 mRNA水平显著上升,而Bax mRNA和Caspase-3 mRNA水平显著降低(P<0.05)。结论 EDS可以减轻UV辐射诱导的HLE-B3细胞凋亡,对UV诱导HLE-B3细胞凋亡具有保护作用,对辐射性白内障具有预防作用。
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单位湖北中医药大学; 第一临床学院; 贺州市人民医院