Ⅱ型单纯疱疹病毒糖蛋白D在杆状病毒表达系统中的表达、纯化及免疫效果评价

作者：姜德玉; 刘坤; 张伟; 周朋; 李君丽; 王希良; 于三科

来源：免疫学杂志, 2010, (06): 494-497.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20100116

• Ⅱ型单纯疱疹病毒
• 糖蛋白D
• Bac-to-Bac杆状病毒表达系统
• 免疫原性
• 中和活性 Herpes simplex virus type Ⅱ
• Glycoprotein D (gD)
• Bac-to-Bac baculovirus expression system
• Immunogenicity
• Neutralization activity

目的:利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)糖蛋白D(gD2)进行表达,纯化后评价其免疫效果,以探索HSV-2重组亚单位疫苗的研制。方法:提取HSV-2DNA作为模板,用聚合酶链式反应(PCR)扩增gD2基因,克隆至pFastBac HTA载体中,利用载体中的His基因标记gD2,通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达His-gD2融合蛋白,表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot检验,用镍柱进行纯化,免疫小鼠评价其免疫原性。结果:HSV-2gD2在昆虫细胞Sf9中得到特异性表达,纯化后的重组蛋白诱导小鼠体内产生高水平的IgG抗体及中和抗体...

• 单位
  军事医学科学院; 西北农林科技大学; 病原微生物生物安全国家重点实验室