二甲双胍通过抑制核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶(P70S6)调节体外人颗粒细胞胰岛素受体底物-1(IRS-1)的表达

作者：张永芳; 王蒙蒙; 李昕; 王永峰; 裴秀英; 王燕蓉; 马会明; 徐仙

来源：生殖与避孕, 2015, 35(03): 146-153.

• 二甲双胍
• 核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶(P70S6k)
• 胰岛素受体底物-1(IRS-1)
• 人颗粒细胞

目的: 探讨二甲双胍对核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶(P70S6k)及胰岛素受体底物-1(IRS-1)蛋白及其ser307位点磷酸化表达的影响。方法: 利用0.1 mmol/L二甲双胍体外连续作用多囊卵巢综合症(PCOS)患者黄素化颗粒细胞24 h为实验组, 设未加二甲双胍培养的颗粒细胞为对照组。通过RT-PCR和Real-time PCR检测P70S6k和IRS-1的表达, 细胞免疫荧光化学和Western blotting的方法检测P70S6k、p-thr389-P70S6k、IRS-1及p-ser307-IRS-1蛋白的表达。结果: Real-time PCR结果显示实验组P70S6k和IRS-1mRNA水平显著低于对照组, 差异有统计学意义(P<0.05)。细胞免疫荧光化学检测IRS-1和p-ser307-IRS-1蛋白在颗粒细胞胞质表达, P70S6k和p-thr389-P70S6k蛋白在细胞核表达。Western blotting法结果显示二甲双胍作用24 h前、后卵巢颗粒细胞P70S6k、p-thr389-P70S6k、IRS-1及p-ser307-IRS-1蛋白表达有统计学差异(P<0.05), 灰度值分析显示添加二甲双胍组P70S6k、p-thr389-P70S6k蛋白表达显著升高, IRS-1及p-ser307-IRS-1蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论: 二甲双胍可抑制人颗粒细胞P70S6k的表达, 并通过Akt/P70S6k/IRS途径调节IRS-1的表达, 从而增加颗粒细胞胰岛素的敏感性。

• 单位
  宁夏医科大学总医院; 宁夏医科大学