木薯MeXYLP1基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体构建及验证

作者：任思杨; 毋志浩; 王晓彤; 张亚文; 张兴龙; 李瑞梅; 姚远; 郭建春; 刘姣^*; 胡新文^*

来源：分子植物育种, 2023, 1-14.

• 木薯(Manihot esculenta Crantz)
• 基因编辑
• 载体构建
• 木质形成素

阿拉伯半乳糖蛋白(Arabinogalactan proteins， AGP)是一种广泛分布在植物各组织器官的一种糖蛋白，对植物的生长发育特别是细胞壁的形成起着至关重要的作用。木薯MeXYLP1基因隶属于木薯AGP基因家族，是其大家族的一个亚族成员。为了鉴定其基因功能，在CRISPR-P v2.0在线网站设计靶点，构建基因编辑载体pCAMBIA1301-Cas9-MeXYLP1-sg RNA。通过农杆菌介导侵染木薯的愈伤组织，诱导产生MeXYLP1基因的木薯突变体。对转基因愈伤组织的基因编辑位点以及潜在脱靶位点进行Sanger测序，结果表明MeXYLP1基因被成功编辑，且潜在脱靶位点未脱靶。本实验所获得的材料有助于研究MeXYLP1基因在木薯细胞壁中所发挥的功能。

• 单位
  中国热带农业科学院热带生物技术研究所; 生命科学学院; 海南大学; 农业部