食源性单增李斯特菌毒力岛4基因缺失株的构建及其体外毒力研究

作者:阮婷玉; 康立超; 刘扬扬; 李红欢; 李楠; 马勋*; 王静*
来源:中国动物传染病学报, 2023, 31(02): 36-43.
DOI:10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.2023.02.009

摘要

为研究单增李斯特菌毒力岛4(LIPI-4)对单增李斯特菌(LM)LM928毒力强弱的影响及其在LM穿越血脑屏障时发挥的作用。本研究利用同源重组技术构建LIPI-4缺失株,将亲本株与缺失株以不同的MOI值感染脑微血管内皮细胞(HCMEC)后,通过细胞增殖与细胞毒性试剂盒(CCK-8)检测细胞活性,空斑试验检测细胞病变及细菌胞间迁移率以及胞内增殖试验检测LIPI-4缺失后对LM胞内增殖的影响。结果表明:本试验成功构建LIPI-4缺失株。与亲本株相比,LIPI-4缺失株侵染HCMEC后,细胞活性极显著增强(P<0.01);空斑形成数量极显著降低(P<0.01);胞内增殖速度减慢,胞内增殖12 h时菌量极显著减少(P<0.01)。体外细胞实验表明LIPI-4的缺失显著降低了LM的毒力。研究结果可为LIPI-4在LM穿越血脑屏障时的作用机制提供研究基础。