番木瓜干旱胁迫相关CpDHN基因的克隆与原核表达

作者：郭静远; 邹智^*; 孔华; 郭运玲; 郭安平^*

来源：热带作物学报, 2020, 41(12): 2406-2412.

DOI：10.3969/j.issn.1000-2561.2020.12.006

• 番木瓜
• 脱水素
• 基因克隆
• 表达分析
• 原核表达

本研究基于转录组获得的CpDHN转录本序列,以番木瓜‘台农二号’组培苗叶片为材料,采用RT-PCR技术克隆了该基因包含完整ORF在内的425 bp cDNA序列。序列分析表明,CpDHN预测编码93个氨基酸,其理论分子量为10.50 kDa、等电点为6.62、总平均疏水指数为-1.984、核定位。除保守的K片段外,蛋白还含有1个S片段,可归为KS型脱水素。在拟南芥中的10个脱水素中,CpDHN与AtLEA8的亲缘关系最近,相似性为53.3%。值得注意的是,虽然CpDHN的编码区不存在内含子,但其3’UTR含有1个与AtLEA8类似的内含子。表达谱分析显示,该基因在根和叶片中均受干旱胁迫诱导。此外,还构建了CpDHN的原核表达载体,SDS-PAGE分析显示,该蛋白在大肠杆菌中可高效表达。这些结果为下一步的功能鉴定奠定了坚实的基础。

• 单位
  中国热带农业科学院热带生物技术研究所; 海南大学