新城疫病毒F48E9株F-HN蛋白融合基因在毕赤酵母中的表达

作者：郭建军; 范汉东; 杨一兵; 罗成

来源：广东农业科学, 2011, 38(20): 130-133.

DOI：10.16768/j.issn.1004-874x.2011.20.075

• 新城疫病毒
• F-HN基因
• 共表达
• 毕赤酵母

利用重叠PCR技术拼接新城疫病毒F蛋白基因和HN蛋白基因,并将构建好的融合基因克隆到载体pET28a,经测序后融合基因插入表达载体pPIC9K中,在启动子AOXⅠ和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白F-HN。重组质粒pPIC9K-F-HN经SacⅠ线性化后,电击转化毕赤酵母GS115,经G418筛选得到转化子。PCR扩增鉴定后,用甲醇诱导表达,SDS-PAGE分析结果表明,目的蛋白为分泌性表达,分子量约为86.5 ku;Western-blot结果表明融合蛋白具有良好的免疫反应性,为下一步研究高效亚单位基因工程苗奠定基础。

• 单位
  江西省科学院微生物研究所