摘要

目的评价褪黑素预先给药对大鼠肺缺血再灌注时细胞凋亡和自噬的影响。方法成年雄性SD大鼠36只,体重230~280 g,采用随机数字表法分为3组(n=12):假手术组(Sham组)、肺缺血再灌注组(LIR组)和褪黑素预先给药组(MLT组)。LIR组和MLT组采用夹闭左肺门60 min,再灌注2 h的方法制备肺缺血再灌注损伤模型。MLT组夹闭左肺门前15 min时腹腔注射褪黑素1mg/100 g。再灌注2 h处死大鼠,行支气管肺泡灌洗,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),测定BALF蛋白浓度;取肺组织,光镜下观察病理学结果 ,并进行肺损伤评分,测定湿重/干重(W/D)比值,采用TUNEL法观察细胞凋亡情况,计算细胞凋亡指数,采用Western blot检测Bcl-2、Bax、微管相关蛋白1轻链3BⅠ(LC3BⅠ)、LC3BⅡ、Beclin-1和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白受体(p-mTOR)的表达水平,计算Bcl-2/Bax比值和LC3BⅡ/LC3BⅠ比值。结果与Sham组比较,LIR组和MLT组BALF蛋白浓度、肺组织W/D比值、细胞凋亡指数、LC3BⅡ/LC3BⅠ比值及Beclin-1表达水平升高,Bcl-2/Bax比值及p-mTOR表达水平降低(P<0.05);与LIR组比较,MLT组BALF蛋白浓度、肺组织W/D比值、细胞凋亡指数、LC3BⅡ/LC3BⅠ比值及Beclin-1表达水平降低,Bcl-2/Bax比值及p-mTOR表达水平升高(P<0.05)。结论褪黑素预先给药减轻大鼠肺缺血再灌注损伤的机制可能与抑制细胞凋亡和自噬水平有关。

  • 单位
    牡丹江医学院; 牡丹江医学院附属红旗医院