舒芬太尼调控微小RNA-495影响肝癌细胞的增殖、侵袭迁移和凋亡

作者：韩威利; 王凯; 李明勇; 赵英玲; 金胜^*; 王培山

来源：中华实验外科杂志, 2020, 37(04): 658-662.

• 舒芬太尼
• 微小RNA-495
• 肝癌
• 细胞增殖
• 迁移
• 侵袭
• Wnt/β-连环蛋白信号通路

目的探讨舒芬太尼(SUF)对肝癌细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的影响及其机制。方法 2018年12月至2019年8月, 将Hep3B细胞(购自上海联迈生物工程有限公司)分为miR-NC组、miR-495组、SUF(购自德国IDT Biologika公司)+抗-miR-NC组、SUF+抗-miR-495组, 采用不同浓度的SUF处理肝癌Hep3B细胞, 检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测微小RNA(miRNA, miR)-495的表达水平。将miR-495模拟物(miR-495 mimics)转染Hep3B细胞, 采用上述方法检测以上指标变化。将miR-495抑制物(抗miR-495)转染至Hep3B细胞, 经10 μmol/L的SUF干预后, 采用上述方法检测以上指标变化。蛋白质印迹法(Western blot)检测SUF对Hep3B细胞对Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。两组间比较采用t检验。多组间比较采用单因素方差分析, 进一步组间两两比较采用SNK-q检验。结果与干预前[(100.15±10.05)%、(225.36±22.53)个、(153.76±15.38)个、(6.73±0.67)%、1.00±0.10、1.05±0.11]比较, SUF(10.0 μmol/L)处理后Hep3B细胞存活率[(62.38±6.25)%]、迁移[(108.24±10.85)个]和侵袭[(80.42±8.05)个]细胞数显著降低, 凋亡率[(20.36±2.05)%]、miR-495表达(2.99±0.31)显著升高, β-catenin蛋白(0.42±0.04)表达显著降低(t=9.574、14.051、12.674、18.959、18.328、16.147, P<0.05), 差异有统计学意义。与转染miR-NC[(100.88±10.09)%、(230.76±23.08)个、(158.66±15.85)个、(6.83±0.68)%]比较, 转染miR-495后Hep3B细胞存活率[(52.08±5.20)%]、迁移[(124.38±12.46)个]和侵袭[(84.09±8.40)个]细胞数显著降低, 凋亡率[(17.29±1.73)%]显著升高(t=12.897、12.168、12.471、16.881, P<0.05), 差异有统计学意义。与单独SUF[(100.09±10.76)%、(111.31±11.14)个、(85.08±8.51)个、(22.13±2.20)%、0.45±0.05]干预比较, 抑制miR-495联合SUF处理后Hep3B细胞存活率[(134.08±13.44)%]、迁移[(189.26±19.01)个]和侵袭[(131.24±13.15)个]细胞数显著升高, 凋亡率[(10.22±1.05)%]显著降低, β-catenin(0.89±0.09)蛋白表达显著升高(t=5.923、10.613、8.841、14.657、12.821, P<0.05), 差异有统计学意义。结论舒芬太尼通过上调miR-495抑制肝癌细胞增殖、侵袭和迁移, 促进细胞凋亡, 其机制与抑制Wnt/β-catenin信号通路活化有关。

• 单位
  湖北文理学院; 新乡市中心医院; 襄阳市中心医院