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摘要
目的探讨铁皮石斛叶发酵液对酒精性肝炎(AH)小鼠的干预效果及机制。方法选取70只6～8周龄近交品系C57BL/6J雄性小鼠, 按随机数字表法分为正常组(NG)、模型组(MG)、液体饲料对照组(CG)、水飞蓟宾组(SI)及铁皮石斛叶发酵液低剂量组(DL)、中剂量组(DM)、高剂量组(DH), 每组10只。NG组给予普通饲料喂养, CG组给予对照饲料(LB酒精液体对照饲料), SI组给予LB酒精液体饲料及水飞蓟宾灌胃, DL、DM和DH组分别给予LB酒精液体饲料及25%、50%、100%浓度的铁皮石斛叶发酵液灌胃。LB酒精液体饲料喂养8周建立AH模型。第8周取小鼠眼球血, 检测丙氨酸转氨酶(ALT)、甘油三酯(TG)、转铁蛋白(TRF)、白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)等含量;并取肝组织行HE、油红O、普鲁士蓝和免疫荧光ROS染色;肝组织匀浆检测谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量;PCR及Western 印迹法检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、AMPKβ1、磷酸化AMPKβ1(p-AMPKβ1)、抑癌基因p53(p53)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GXP4)的mRNA及蛋白相对表达量, 以分析铁皮石斛叶发酵液对AH小鼠的干预效果及机制。结果与MG组相比, DL、DM、DH组小鼠血清ALT和TG均降低[ALT分别为(45.94±19.85)、(45.73±22.62)、(41.68±7.13)比(75.51±17.76)U/L;TG分别为(0.90±0.23)、(0.69±0.22)、(0.41±0.20)比(1.28±0.19)mmol/L, 均P<0.05];IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ均降低(均P<0.05);DM、DH组小鼠血清TRF、IL-10均升高(均P<0.05)。与模型组相比, DL、DM、DH组小鼠肝组织MDA均降低[分别为(0.41±0.05)、(0.40±0.03)、(0.43±0.14)比(0.64±0.06)μmol/g], GSH均升高(均P<0.05)。与模型组相比, DL、DM、DH组小鼠肝组织AMPK(分别为1.36±0.11、1.61±0.17、1.68±0.11比0.80±0.12)、SLC7A11(分别为0.91±0.12、0.97±0.12、0.99±0.13比0.60±0.14)、GPX4(分别为0.51±0.11、0.63±0.17、0.83±0.15比0.42±0.14)的mRNA表达量均增加(均P<0.05)。与模型组相比, DL、DM、DH组小鼠肝组织AMPKβ1、p-AMPKβ1、SLC7A11和GPX4的蛋白相对表达量均增加, p53蛋白相对表达量降低(均P<0.05)。与模型组相比, DL、DM、DH组小鼠肝组织脂肪变性、小叶内炎症程度减轻, 肝组织铁染色、ROS染色变浅。结论铁皮石斛叶发酵液可减轻小鼠AH的严重程度, 其机制可能与上调AMPK抑制p53/SLC7A11/GPX4介导的铁死亡通路有关。
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