嵌合体的动态定量检测在异基因造血干细胞移植中的应用

作者：唐晓文; **沛; 朱子玲; 王玮; 孙爱宁; 仇惠英; 傅铮铮; 常伟荣; 阮长耿

来源：中华血液学杂志, 2004, 25(02): 17-20.

DOI：10.3760/j:issn:0253-2727.2004.02.004

• 造血干细胞移植,异基因
• 串联重复序列
• 电泳,毛细管
• 嵌合体

目的　建立荧光标记的多重PCR扩增短串联重复序列 (STR PCR)结合毛细管电泳 ,定量检测供体细胞 (DC)嵌合率的方法 ,并探讨该方法的连续定量检测对异基因造血干细胞移植 (allo HSCT)后转归的预警作用。方法　采集 31例接受骨髓移植 (BMT)或非清髓外周血干细胞移植 (NST)患者移植前、移植后不同时段的外周血或骨髓。DNA样本用ProfilerPlus商品化试剂盒扩增后 ,用ABI 310遗传分析仪进行毛细管电泳 ,确定基因位点及峰面积 ,根据供受体基因型的差异选择嵌合率计算公式。结果　 31例患者中 15例 (48.4 % )为性别相合移植 ,只能通过STR PCR进行嵌合体的定量分析 ;性别不合移植患者用STR PCR和荧光原位杂交两种方法定量测得的DC嵌合率一致 ;31对供受体中能区别出供受差别的STR位点有 6 .7(2～ 10 )个 ,所有患者均在移植后 7天 (+7天 )出现供体来源的细胞 ,BMT组 +7天、+14天和 +1个月DC中位数均明显低于NST组 ,而在移植中后期无显著性差异。 +2 1天时BMT和NST患者均达稳定嵌合 ,DC在 92 %以上 ;中位随访 17(3.5～ 2 9.0 )个月 ,2 6例患者DC≥90 % ,均获得持久植入 ,至今均为无白血病生存。另有 5例患者出现不稳定混合嵌合 (MC)状态 (DC为2 7.3%～ 6 2 .7% ) ,其中 4例复发 ,1例出现移植物被排斥。上述 5例患者均

• 单位
  苏州大学附属第一医院