摘要

目的:探讨内皮祖细胞(EPCs)在大鼠肝癌模型形成中的作用.方法:分离培养大鼠EPCs,体外用4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)标记后,将EPCs-DAPI制成1×105/150μL,2×105/150μL,4×105/150μL的低、中、高浓度悬液,模型组和EPCs移植组的SD大鼠腹腔注射二乙基亚硝胺(DEN)制成肝癌模型,空白组注射等量的生理盐水,EPCs移植组经尾静脉注射低、中、高浓度EPCs-DAPI悬液1mL,空白组和模型组经尾静脉注射生理盐水1mL,分别于第4、6、8周末处死,留取血清和肝脏组织标本,检测EPCs标志物CD34、CD133和KDR表达,检测各组血清ALT、AST、AFP的表达,观察EPCs-DAPI表达的量及分布的变化,并用Imageproplus图像分析软件对EPCs-DAPI表达的阳性区域面积(PA)作半定量分析.结果:培养的细胞7d后检测细胞表面标志物CD34、CD133和KDR的表达均呈阳性,低浓度EPCs移植4wk组较ALT、AST、AFP模型对照4wk组显著升高(P<0.01);中浓度EPCs移植6wk组较ALT、AST、AFP模型对照6wk组显著升高(P<0.01);高浓度EPCs移植8wk组较ALT、AST、AFP模型对照8wk组显著升高(P<0.01);EPCs移植组中DAPI均呈阳性,且依注射EPCs悬液浓度高低和时间长短呈上升趋势,表达逐渐增强,在视野中密集分布,染色渐深.EPCs低、中、高浓度移植4wk组,EPCs低、中、高浓度移植6wk组和EPCs低、中、高浓度移植8wk组PA值比较,差异具有显著性(P<0.05);低浓度EPCs移植4、6、8wk组,中浓度EPCs移植4、6、8wk组和高浓度EPCs移植4、6、8wk组PA值比较,差异无显著性.结论:EPCs在肝癌形成过程中对肝功能有影响,且随着造模时间的延长而加重.EPCs在肝癌形成过程中有促进作用.EPCs体内示踪在肝组织的分布和表达水平表明其对肝癌有靶向作用.