RNAi技术对人脑微血管内皮细胞ANXA2基因表达水平的影响

作者：罗文英; 丁瑜; 钟琼

来源：广东医学院学报, 2016, 34(05): 471-474.

• ANXA2
• RNAi
• EV71

目的研究RNAi技术对人脑微血管内皮细胞(Human brain microvascular cells,HBMEC)ANXA2基因表达水平的影响。方法将化学合成三对siRNA采用ribo FECTTMCP转染试剂介导法转染HBMEC,应用荧光定量PCR法检测RNA干扰后ANXA2 mRNA表达量,得出抑制率。应用Western-blot检测RNA干扰后对ANXA2蛋白表达的影响。结果成功将siRNA转染HBMEC,荧光定量PCR结果显示,在转染24 h后,各干扰组与阴性组比较ANXA2基因表达量明显下调(P<0.01),Western-blot显示siRNA-ANXA2-2、siRNA-ANXA2-3转染前后ANXA2蛋白的表达水平明显受到抑制。结论合成的ANXA2 siRNA能有效抑制ANXA2蛋白的表达、降低ANXA2 mRNA水平,对ANXA2有高效和特异的沉默作用,以ANXA2为靶点的RNA干扰技术可望成为鉴定HBMEC有关EV71膜受体的新策略。

• 单位
  广东医科大学附属医院