促红细胞生成素通过叉头状转录因子O1-糖原合酶激酶3β信号改善棕榈酸诱导HepG2细胞糖代谢

作者：张红; 毕艳; 葛智娟; 汤孙寅炎; 尹雯雯; 孟然; 张芃子; 朱大龙^*

来源：中华糖尿病杂志, 2016, 8(03): 157-161.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1674-5809.2016.03.008

• 促红细胞生成素
• HepG2细胞
• 叉头状转录因子O1
• 糖原合酶激酶3β

目的观察促红细胞生成素(EPO)处理对棕榈酸(PA)诱导HepG2细胞糖异生及糖原合成的影响及作用机制。方法 250 μmol/L的PA作用HepG2细胞24 h, 分别用5、10 U/ml EPO作用24 h, 另外, EPO处理的HepG2细胞分别加入磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂LY294002或渥曼青霉素(wortmannin)预孵育1 h。比色法检测HepG2细胞糖原含量, Western blotting检测磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、PI3K蛋白表达、蛋白激酶B(AKT)、叉头状转录因子O1(FOXO1)、糖原合酶激酶3β (GSK-3β)表达。多组间比较采用方差分析。结果与PA处理组相比, 5 U/ml和10 U/ml EPO处理组细胞下游分子GSK-3β(分别为1.02±0.03比0.74±0.11、1.06±0.02比0.74±0.11, t=4.236、4.996, 均P<0.05)及FOXO1磷酸化水平明显增强(分别为0.99±0.05比0.73±0.09、1.13±0.06比0.73±0.09, t= 4.798、6.757, 均P<0.05)。与EPO治疗组比较, 加入抑制剂LY294002或wortmannin后, GSK-3β(0.68±0.09比1.12±0.14、0.76±0.10比1.12±0.14, t=-4.632、-3.655, 均P<0.05)及FOXO1(0.92±0.02比1.15±0.06、0.72±0.07比1.15±0.06, t=-6.532、-7.984, 均P<0.05)磷酸化水平均明显被抑制。结论在PA诱导的HepG2细胞, EPO可能通过PI3K/AKT介导的FOXO1、GSK-3β通路改善糖代谢。

• 单位
  南京大学医学院附属鼓楼医院; 南京医科大学