MicroRNA-34a调控c-Met表达对肝癌细胞的增殖及迁移和侵袭的影响

作者：蒋伟; 李涛; 王静静; 施晓; 季国忠^*

来源：医学研究生学报, 2020, 33(02): 139-143.

DOI：10.16571/j.cnki.1008-8199.2020.02.006

• 肝癌
• miR-34a
• c-Met
• 侵袭性生长

目的 MicroRNA-34a在原发性肝癌中的作用及其相关机制仍有待探究。文中旨在探讨miR-34a对肝癌增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法使用脂质体转染试剂2000瞬时转染miR34a过表达、过表达对照质粒,建立miR-34a过表达的肝癌细胞HepG2和Huh-7细胞系,分为过表达组(转染过表达质粒miR-34a mimics)、过表达对照组(转染过表达对照质粒miR-34a mimics control)和空白组(未转染质粒)。qPCR检测各组细胞miR-34a的表达水平;使用CCK8增殖实验、克隆形成实验和Transwell实验,体外水平检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭能力的变化;构建裸鼠肝癌皮下移植瘤模型,体内水平检测miR-34a对肝癌移植瘤的治疗作用。另将7 d后成瘤裸鼠随机分为miR-34a组(注射miR-34a micmics)和对照组(注射miR-34a micmics control),每组6只。荧光素酶报告基因实验鉴定miR-34a在肝癌中的靶基因。结果过表达组HepG2、Huh-7细胞miR-34a表达水平显著高于过表达对照组、空白组(P<0.01)。过表达组48、72、96 h细胞增殖活力较过表达对照组显著降低(P<0.01)。过表达组HepG2、Huh-7细胞的克隆形成数[(28.00±4.36)个、(51.33±9.56)个]较过表达对照组[(52±5.81)个、(97.33±6.74)个]显著降低(P<0.05)。过表达组HepG2、Huh-7细胞迁移能力、侵袭能力较过表达对照组显著降低(P<0.01)。成瘤14 d后,过表达组移植瘤重量显著低于过表达对照组的[(45.488±11.651)mg vs(125.408±27.107) mg,P<0.01],肿瘤体积亦显著低于过表达对照组(P<0.01)。miR-34a组pGL3-c-Met的荧光素酶活性较对照组显著升高[(0.717±0.052)vs(0.517±0.098),P<0.05]。结论肝癌中miR-34a水平上调可以抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其对肝癌细胞侵袭性生长的调控作用可能通过靶向下调c-Met表达实现。

• 单位
  南京医科大学第二附属医院