熊猫源唾液乳杆菌的分离鉴定及部分生物学特性分析

作者：王黎明; 张文平; 王洁; 谢军金; 周杰珑^*

来源：野生动物学报, 2019, 40(03): 537-546.

DOI：10.19711/j.cnki.issn2310-1490.2019.03.002

• 大熊猫
• 抗生素
• 益生菌
• 唾液乳杆菌

本研究旨在分离大熊猫肠道内唾液乳杆菌,为获得抑菌效果好,适应性强的熊猫源乳酸菌。通过选取健康大熊猫新鲜粪便,利用MRS培养基进行厌氧培养和单克隆纯化,通过形态学、生理生化鉴定、16S r DNA基因序列测定及同源性分析筛选到10株唾液乳杆菌。采用牛津杯法、活菌计数法、药敏纸片法(K-B法)和PCR技术对分离菌株作进一步的耐受性、抑菌性和耐药性分析。结果表明:ZM02、ZZ03菌株在p H2. 0的条件下培养2 h有76. 62%、80. 75%的存活率;在胆盐浓度为0. 3%的条件下培养2 h有97. 76%、99%的存活率。抑菌试验结果表明:大肠杆菌抑菌效果最佳为ZM01(10. 45±0. 43) mm;乙型副伤寒沙门氏菌抑菌效果最佳为ZZ03 (12. 58±0. 24) mm;铜绿假单胞菌抑菌效果最佳为ZZ04 (13. 99±0. 29) mm;金黄色葡萄球菌抑菌效果最佳为ZM06(16. 85±0. 32) mm。耐药基因检测结果表明26对耐药基因仅有ZM02菌株未检测含有耐药基因。药敏实验表明:分离菌株对青霉素类(盘尼西林除外)、其他抗生素类(呋喃妥因、亚胺培南)和氯霉素类均无耐药。综上所述,本研究从大熊猫新鲜粪便中分离鉴定得到10株唾液乳酸杆菌并从中筛选到一株生物特性好、抑菌效果明显、不含耐药基因的唾液乳杆菌-编号103并命名ZM02。该研究可为后续熊猫源微生态制剂提供发展空间。

• 单位
  成都大熊猫繁育研究基地; 西南林业大学; 生命科学学院