5-氮-2'-脱氧胞苷对膀胱癌T24细胞株RUNX3表达及生物学行为的影响

作者：周琦; 周祥福; 肖运政; 张涛; 王林; ***

来源：现代泌尿生殖肿瘤杂志, 2009, 1(4): 219-223.

DOI：10.3870/j.issn.1674-4624.2009.04.009

• 膀胱肿瘤
• RUNX3基因
• 5-氮-2’-脱氧胞苷
• 细胞凋亡

目的 通过观察DNA启动子区域CpG岛去甲基化对T24膀胱癌细胞株runt相关转录因子3基因(runt-related transcription factor 3 gene,RUNX3)表达及对细胞生物学行为的影响,探讨膀胱癌基因治疗的新靶点. 方法 甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)和非甲基化特异性PCR(un-methylation specific PCR,UMP)检测经特异性DNA甲基转移酶抑制剂5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'deoxycytidine,5-Aza-CdR)处理前后的膀胱癌T24细胞RUNX3基因的甲基化状态;分别以0.5、5.0和50.0μmol/L 5-Aza-CdR处理T24细胞后,半定量RT-PCR检测细胞RUNX3基因mRNA的表达,四唑盐(MTT)比色法观察细胞的增殖活性,流式细胞仪分析细胞的凋亡状况. 结果 膀胱癌T24细胞RUNX3基因启动子区域CpG岛存在甲基化现象,而经5-Aza-CdR处理后未发现其甲基化;经不同浓度5-Aza-CdR处理后的T24细胞RUNX3 mRNA重新表达,且其表达量(0.51±0.06、0.60±0.04、0.69±0.08)与药物剂量呈正相关(F=102.21,P<0.01);与对照组相比,经5-Aza-CdR处理后的T24细胞增殖明显受到抑制,凋亡增加(4.16%±1.56%、25.82%±1.81%、41.77%±3.25%、66.59%±3.16%,P<0.01),且与药物存在剂量依赖关系(F=316.47,P<0.01). 结论 T24膀胱癌细胞株RUNX3基因启动子区域CpG岛的甲基化可能是导致该基因表达沉默的主要原因,特异性DNA甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR能够通过逆转T24细胞RUNX3基因的异常甲基化,诱导该基因的重新表达而恢复其抑癌功能.

• 单位
  广东省东莞市厚街医院; 中山大学附属第三医院