急性GVHD发生与未发生者移植物FOXP3 mRNA表达的差异性研究

作者：王志东; 冯四洲; 周世勇; 王玫; 周征; 翟文静; 韩明哲

来源：中国实验血液学杂志, 2006, (06): 1215-1220.

DOI：10.3969/j.issn.1009-2137.2006.06.032

• FOXP3
• 基因表达
• 急性移植物抗宿主病
• 异基因造血干细胞移植

本研究探讨移植物FOXP3mRNA表达与HLA相合同胞供者异基因造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的关系。对26例HLA相合同胞供者异基因造血干细胞移植患者移植物CD4+CD25+和CD4+CD25highT细胞、FOXP3mRNA表达与aGVHD的关系进行了评价。用流式细胞术检测了脐血、正常人外周血、移植物的CD4+CD25+和CD4+CD25highT细胞比例;以β2-MG为内参照,实时定量RT-PCR检测了FOXP3mRNA相对表达量,采用融解曲线和琼脂糖电泳鉴定PCR产物特异性。结果表明正常人外周血、动员的外周血干细胞(PBSC)和BM移植物CD4+CD25+T细胞为连续的细胞群,CD4+CD25+T和CD4+CD25highT细胞比例分别为(48.5±16.3)%和(9.6±2.5)%,(42.1±14.7)%和(13.1±4.2)%,(43.4±9.6)%和(14.6±4.5)%。aGVHD组移植物CD4+CD25highT细胞比例和绝对值与无aGVHD组相比无显著差异(P>0.05)。不同稀释倍数的FOXP3和β2-MG实时定量PCR相对扩增效率曲线斜率为0.0826;融解曲线分析表明均仅有单一峰,Tm值分别为86.5℃和82.3℃;琼脂糖电泳显示都仅有单一扩增产物。PBSC移植中无aGVHD组FOXP3mRNA相对表达量(中位数41.0×10-5)是有aGVHD组(中位数12.9×10-5)的318%,二者有显著性差异(P=0.03)。COX回归法分析排除aGVHD其他相关因素的影响。结论CD25不是CD4+调控性T细胞可靠的细胞标志;应用SYBRGreenI实时定量RT-PCR方法可特异定量FOXP3mRNA;aGVHD组移植物FOXP3mRNA显著低于aGVHD未发生组。FOXP3是调控性T细胞可靠标志,可能是预测aGVHD的有用指标之一。

• 单位
  中国医学科学院; 中国协和医科大学