南瓜蚜传黄化病毒侵染性克隆的构建

作者：刘莉铭; 任倩; 彭斌; 吴会杰; 康保珊; 古勤生^*

来源：植物保护学报, 2022, 49(03): 784-791.

DOI：10.13802/j.cnki.zwbhxb.2022.2020256

• 南瓜蚜传黄化病毒
• 瓜类作物
• 全基因组
• 系统进化分析
• 侵染性克隆

为明确南瓜蚜传黄化病毒（cucurbit aphid-borne yellows virus,CABYV）丝瓜分离物CABYVQY的分子变异情况并获得其侵染性克隆，通过反转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)方法扩增获得该分离物的全基因组序列，利用NCBI Blast和Mega X软件对其进行序列一致性分析和系统发育分析，利用同源重组策略构建该分离物的全长基因组cDNA克隆，并通过根癌农杆菌Agrobacterium tumefacieas介导的方法对其侵染性进行接种检测。序列分析结果显示，该分离物基因组全长为5 682 nt，与其他分离物的核苷酸序列一致性为84.9%～99.2%，氨基酸序列一致性为87.2%～96.8%。系统发育分析结果显示，该分离物与中国分离物（GenBank登录号：EU000535）、美国分离物（GenBank登录号：MK055337）的亲缘关系较近。经接种试验证实，构建的侵染性cDNA克隆可以系统侵染丝瓜、甜瓜、黄瓜和西瓜4种作物，说明分离物CABYV-QY的侵染性克隆构建成功。

• 单位
  中国农业科学院郑州果树研究所