摘要
目的 探讨糖尿病对大鼠胫骨前肌烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)表达和功能的影响。方法 SPF级成年雄性SD大鼠48只,6~8周龄,体重200~250 g。采用随机数字表法将大鼠分为四组:正常对照组(NC组)、糖尿病2周组(D2组)、糖尿病4周组(D4组)和糖尿病8周组(D8组),每组12只。取大鼠胫骨前肌,采用Western blot法检测ε-nAChR、γ-nAChR及α7-nAChR蛋白含量,RT-PCR法检测ε-nAChR、γ-nAChR及α7-nAChR mRNA表达量。采用I125-α-银环蛇毒素对运动终板nAChR进行放射性标记,根据放射性强度值计算运动终板nAChR的数目、密度和终板面积(ESA)。检测罗库溴铵预处理的胫骨前肌运动终板,记录运动终板nAChR与罗库溴铵浓度为2.5、5.0、7.5、10.0μg/ml时的结合力。结果 与NC组比较,D2组γ-nAchR和α7-nAchR mRNA表达量明显升高,ESA明显增大(P<0.05);D4组γ-nAchR、α7-nAchR蛋白含量明显升高,ε-nAchRh、γ-nAchR和α7-nAchR mRNA表达量均明显升高,ESA明显增大,罗库溴铵浓度为2.5、5.0μg/ml时nAChR与罗库溴铵结合力均明显降低(P<0.05);D8组ε-nAchR、γ-nAchR、α7-nAchR蛋白含量和mRNA表达量均明显升高,胫骨前肌运动终板nAChR数目明显增多、密度明显增大、ESA明显增大,罗库溴铵浓度为2.5、5.0、7.5、10.0μg/ml时nAChR与罗库溴铵结合力均明显降低(P<0.05)。与D2组比较,D4组ε-nAchR和γ-nAchR蛋白含量均明显升高,ε-nAchR和α7-nAchR mRNA表达量明显升高,nAChR数目明显增多、ESA明显增大,罗库溴铵浓度为5.0μg/ml时nAChR与罗库溴铵结合力均明显降低(P<0.05);D8组ε-nAchR、γ-nAchR、α7-nAchR蛋白含量和mRNA表达量均明显升高,nAChR数目明显增多、密度明显增大、ESA明显增大,罗库溴铵浓度为2.5、5.0、7.5、10.0μg/ml时nAChR与罗库溴铵结合力均明显降低(P<0.05)。与D4组比较,D8组ε-nAch、γ-nAchR蛋白含量和mRNA表达量均明显升高,nAChR数目明显增多、密度明显增大,罗库溴铵浓度为7.5μg/ml时nAChR与罗库溴铵结合力明显降低(P<0.05)。结论 糖尿病可影响nAChR的表达和功能,使胫骨前肌γ-nAChR和α7-nAChR蛋白含量升高,ε-nAChR蛋白含量先降低后逐渐升高,ε-nAChR、γ-nAChR和α7-nAChR mRNA表达量升高,运动终板nAChR数目增多、密度增大、与罗库溴铵结合力降低。
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单位中国医学科学院北京协和医学院; 中日友好医院