乙型肝炎病毒XTP12在大肠埃希菌中表达及生物信息学分析

作者：李晓光; 成军; 洪源; 王慧芬

来源：实用肝脏病杂志, 2007, 10(06): 361-365.

DOI：10.3969/j.issn.1672-5069.2007.06.001

• 乙型肝炎病毒
• X蛋白
• 反式激活蛋白
• 生物信息学 Hepatitis B virus X protein Prokaryotic expression Transactivating protein

目的构建乙型肝炎病毒X蛋白反式激活蛋白2(XTP12)原核表达载体并诱导其在大肠埃希菌中表达。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,以从HepG2细胞提取的mRNA为模板,扩增XTP12目的基因片段,T-A克隆连接到pGEM-T载体,测序正确后将目的片段插入原核表达载体pET-32a(+)中,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导XTP12融合蛋白的表达,并通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western blot免疫印迹分析和证实融合蛋白的表达。生物信息学方法对蛋白结构和功能进行预测。结果利用RT-PCR扩增获得XTP12基因片段,IPTG诱导BL...

• 单位
  中国人民解放军总医院; 中国人民解放军第302医院; 北京地坛医院