耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌噬菌体vBKpnP1的分离鉴定和生物学特性研究

作者：罗书泓; 汪璐; 徐朝霞; 刘佳姣; 张维维; 冯健^*; 李福祥^*

来源：陆军军医大学学报, 2023, 45(10): 1030-1039.

DOI：10.16016/j.2097-0927.202208219

• 噬菌体
• 碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌
• 生物学特性
• 基因组分析

目的 分离出1株裂解碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae, CRKP)的噬菌体，研究其生物学特性和全基因组信息。方法 采用双层琼脂平板法从西部战区总医院污水中分离纯化噬菌体，通过透射电镜观察噬菌体的形态，测定噬菌体的生物学特性和体外抑菌活性，进行全基因组测序并分析其结构特征，系统发育进化树和比较基因组分析其进化关系。结果 分离出1株烈性噬菌体，命名为vB＿KpnP1,形成的噬菌斑为2～3 mm透明的圆形，周围有明显的晕环；电镜下发现该噬菌体的头部大小约68.2 nm×64.3 nm,尾部长约11 nm,其头部为正二十面体，有1条不可收缩的短尾，属于有尾噬菌体目，自复制短尾噬菌体科；其最佳感染复数(multiplicity of infection, MOI)为0.000 1,潜伏期为10 min,裂解期为30 min,爆发量为26 PFU/cell; 10 min吸附率约为80%;该噬菌体对氯仿不敏感，在温度为10～50℃、pH值为4～12条件下较稳定；其对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌裂解率为54.55%(12/22);体外抑菌实验表明其可抑制宿主菌的生长。噬菌体vB＿KpnP1为双链DNA(dsDNA),基因组全长为40 352 bp, GC含量为53.09%,含有50个编码序列(coding sequence, CDS)。结论 成功分离出1株具有治疗碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌感染潜力的毒性噬菌体vB＿KpnP1。

• 单位
  西南医科大学