唇鱼骨基因组DNA提取与ISSR-PCR的优化

作者：吕耀平; 胡则辉; 叶丽平

来源：江西师范大学学报(自然科学版), 2009, (02): 185-189.

DOI：10.16357/j.cnki.issn1000-5862.2009.02.018

• 唇鱼骨
• DNA
• 提取方法
• ISSR
• 优化 Hemibarbu labeo
• DNA
• isolation method
• ISSR-PCR
• optimization

以唇鱼骨为材料,分别采用4种不同方法(CTAB法、SDS法、ROSE法及试剂盒)提取基因组DNA,并对影响PCR反应的模板DNA、引物、dNTPs、Mg2+、Taq酶浓度等主要因子进行了优化,建立了适合唇鱼骨基因组DNA的ISSR-PCR反应体系.25μL的PCR反应液含有的组分和终浓度分别为:约60 ng模板DNA,1.2 UTaq酶,0.4μmol/L引物,2.0 mmol/L MgCl2,0.2 mmol/L dNTPs,2%甲酰胺.结果表明,利用优化反应体系对4种不同方法提取的DNA进行PCR扩增,均能得到较好的PCR扩增条带,以试剂盒法最佳,为淡水溪流性同属鱼类遗传多样性分析奠定了技...

• 单位
  丽水学院; 浙江省海洋水产研究所; 浙江大学; 上海海洋大学