番鸭等级前卵泡颗粒细胞体外培养模型的建立

作者:潘晓丽; 蓝立明; 江林; 何文峰; 陈悦; 张迎燕; 吴旭; 李昂*
来源:中国家禽, 2020, 42(11): 11-16.
DOI:10.16372/j.issn.1004-6364.2020.11.003

摘要

试验旨在建立番鸭等级前卵泡颗粒细胞的体外培养模型,为研究番鸭的就巢性和提高产蛋性能提供试验基础。在体外分离培养番鸭小黄卵泡颗粒细胞,探究不同的消化酶(12.5 g/mLⅡ型胶原酶、0.1%Ⅱ型胶原酶和0.25%胰蛋白酶)、消化时间(3 min、5 min、8 min、10 min、15 min、20 min、25 min、30 min和40 min)和血清浓度(含0.5%、1%、2.5%、5%和10%FBS的M199完全培养液)对颗粒细胞增殖的影响,筛选最佳消化体系和培养体系。结果显示:用0.1%的Ⅱ型胶原酶在37℃、5%CO2培养箱中消化8~10 min可获得较优的颗粒细胞;对于刚分离到的颗粒细胞用含0.5%FBS的M199完全培养液先培养24 h后换成无血清的培养液培养,既能维持增殖活性和细胞形态,又能满足后续试验的需要。