去分化脂肪细胞对巨噬细胞极化的影响

作者：刘士强; 张钰; 熊绍恒; 董琛; 黄兆松; 刘恒鑫; 宋雅娟; 余州; 马显杰^*

来源：中华实验外科杂志, 2022, 39(02).

• 去分化脂肪细胞
• 巨噬细胞
• 极化
• 免疫调控

目的观察去分化脂肪细胞(DFAT)对巨噬细胞极化的影响。方法分别向培养液中加入脂多糖(LPS)或白细胞介素4(IL-4), 诱导RAW264.7向M1或M2型巨噬细胞极化。分离培养C57BL/6小鼠DFAT, 并对其进行多向分化诱导, 通过油红O染色、茜素红染色进行成脂、成骨干性鉴定, 利用Transwell小室将DFAT与巨噬细胞共培养24 h, 在显微镜下观察巨噬细胞形态变化, 通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测M1型巨噬细胞相关基因诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、人巨噬细胞趋化蛋白-1 (MCP-1)、肿瘤坏死因子α (TNF-α)和M2型巨噬细胞相关基因精氨酸酶-1 (Arg-1)、壳酶蛋白(Ym-1)、白细胞介素-10(IL-10)表达量的变化。组间比较采用t检验。结果加入LPS或IL-4刺激, 可诱导RAW264.7向M1或M2型巨噬细胞极化。将DFAT细胞与巨噬细胞共培养发现, DFAT细胞可使巨噬细胞的形态发生明显变化, M1组和对照组M0组比较, M1型巨噬细胞相关基因TNF-α的表达显著增高(5.02±0.71比1.00±0.02, t=5.648, P<0.01)、iNOS的表达显著增高(7.44±1.56比1.00±0.06, t=4.143, P<0.01)、MCP1的表达显著增高(19.64±2.48比1.00±0.04, t=7.510, P<0.01);M2组M0组比较, M2型巨噬细胞相关基因Arg1的表达增高(165.40±45.72比1.00±0.07, t=3.597, P<0.05)、IL-10的表达增高(6.86±1.91比1.00±0.07, t=3.055, P<0.05)、YM-1的表达增高(5.17±2.27比1.00±0.03, t=1.834, P<0.05);DM1组较于M1组, TNF-α的表达显著降低(0.93±0.40比5.02±0.71, t=4.979, P<0.05)、iNOS的表达显著降低(1.61±0.83比7.44±1.56, t=3.302, P<0.05), MCP1的表达显著降低(2.22±1.27比19.64±2.48, t=6.244, P<0.05);而DM2组与M2组比较, Arg-1的表达显著增高(493.10±55.37比165.40±45.72, t=4.563, P<0.05)、IL-10的表达显著增高(87.84±26.90比6.86±1.92, t=3.002, P<0.05)、YM-1的表达显著增高(49.11±11.07比5.18±2.28, t=3.887, P<0.05)。结论 DFAT细胞可抑制巨噬细胞向M1型巨噬细胞极化, 促进其向M2型巨噬细胞极化。

• 单位
  中国人民解放军空军军医大学; 第一附属医院整形外科