摘要
目的 探讨miR-524-5p调控HEG1表达对食管癌细胞增殖、上皮间质转化(EMT)的作用机制。方法 qRT-PCR检测食管癌细胞和正常食管上皮细胞中miR-524-5p和HEG1mRNA表达水平。将KYSE30细胞分为mi R-524-5pmimic组、mi R-524-5pNC组、mi R-524-5p mimic+pc DNA3.1组和mi R-524-5p mimic+pc DNA3.1-H E G 1组,另设置不转染的细胞为正常对照组(C o n t r o l组)。C C K-8法检测K Y S E 3 0细胞增殖能力;Westernblot检测EMT相关蛋白、侵袭迁移相关蛋白和HEG1蛋白表达,划痕实验和Transwell实验检测KYSE30细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告基因检测mi R-524-5p和HEG1靶向关系。结果mi R-524-5p在四种食管癌细胞系TE-1、KYSE30、KYSE150、NEC中均低表达(P<0.05),选择表达水平最低的KYSE30细胞作为后续实验细胞。HEG1 m RNA在四种食管癌细胞中均高表达(P<0.05),并且GEPIA数据库显示HEG1在食管癌组织中高表达(P<0.05)。与mi R-524-5pNC组相比,mi R-524-5pmimic组KYSE30细胞增殖能力、克隆形成数、间质标志蛋白水平、迁移和侵袭能力显著降低,上皮标志蛋白E-cadherin水平显著上调(P<0.05);mi R-524-5p mimic+pc DNA3.1-HEG1组可以明显逆转过表达mi R-524-5p对于KYSE30细胞增殖和上皮间质转化、侵袭转移的抑制作用(P<0.05)。mi R-524-5pmimic组与WT-HEG1共转染组细胞荧光素酶活性显著低于mi R-524-5p NC组与WT-HEG1共转染组(P<0.05)。结论 mi R-524-5p在食管癌细胞和组织中低表达,过表达mi R-524-5p可以负向调节HEG1在食管癌细胞系KYSE30细胞中的表达,抑制KYSE30细胞的增殖、EMT进程和侵袭迁移能力。
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单位焦作市人民医院