微囊泡对人卵巢癌细胞耐药性传递作用的初步研究

作者：谷芳; 王淑珍^*

来源：中国计划生育和妇产科, 2021, 13(06): 66-98.

DOI：10.3969/j.issn.1674-4020.2021.06.15

• 微囊泡
• 人卵巢癌细胞
• 耐药

目的探讨微囊泡(microvesicles, MV)在人卵巢癌细胞间耐药性的传递作用。方法以人卵巢癌耐顺铂细胞SKOV3/DDP和敏感细胞SKOV3为模型,用超高速离心法从细胞上清液中提取分离得到SKOV3/DDP的MV;使用基于Megamix Beads的高灵敏度流式细胞仪检测MV,计算MV的提纯率;采用MTT法检测SKOV3/DDP、SKOV3细胞的耐药情况,计算耐药指数;运用流式细胞仪观察SKOV3/DDP、SKOV3/DDP分离的MV分别与SKOV3在微孔滤膜的transwell小室共孵育后对罗丹明123(R123)的外排功能。结果通过超高速离心和高灵敏度流式细胞仪检测到SKOV3/DDP产生的MV提纯率为75.82%;在顺铂的作用下,SKOV3/DDP的细胞活力明显高于SKOV3,SKOV3/DDP在24 h、48 h的耐药指数分别为4.21、4.59。SKOV3/DDP与SKOV3共同孵育后,SKOV3内蓄积的R123的荧光峰向左偏移,蓄积的R123减少,对R123的外排能力增加,耐药性增加;SKOV3/DDP分离的MV与SKOV3共同孵育后,SKOV3内蓄积的R123减少,对R123的外排能力增加,耐药性增加。结论耐药细胞产生的MV可以使敏感细胞获得一定的耐药性,人卵巢癌细胞可能通过一种"非遗传"的方式——MV的介导传递耐药性。

• 单位
  首都医科大学附属北京朝阳医院