外泌体调控猪脂肪间充质干细胞向脂肪源神经干细胞诱导分化的研究

作者：陈蕾; 蒋南; 黄玉风; 孙铭菊; 郇延军; 李方正^*

来源：畜牧与兽医, 2022, 54(06): 53-57.

• 脂肪间充质干细胞
• 外泌体
• 神经干细胞
• 悬浮培养

为探讨猪脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells, ADSCs)来源外泌体对脂肪源神经干细胞(neural stem cells, NSCs)诱导的调控作用，采用含20 ng/mL表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF)、20 ng/mL碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)和2%B27的无血清DMEM/F12培养基，将ADSCs诱导成细胞球，通过免疫荧光技术检测神经干细胞标记蛋白巢蛋白(Nestin)和神经干细胞RNA结合蛋白(Musashi1)的表达，提取ADSCs外泌体，通过纳米粒径跟踪分析(NTA)和透射电镜技术对外泌体进行检测，PKH67染色后荧光显微镜观察ADSCs对外泌体的摄取情况，外泌体与ADSCs共培养作为试验组，不加外泌体作为对照组，qPCR检测外泌体对Nestin和Musashi1基因表达的影响。结果显示：ADSCs经诱导培养获得细胞球，免疫荧光检测显示所获得的细胞球Nestin和Musashi1抗体阳性，表明为诱导形成了神经干细胞；提取的ADSCs外泌体通过NTA和透射电镜检测，符合外泌体特征，而且外泌体能够完整进入ADSCs的细胞质；外泌体处理可以促进Nestin和Musashi1基因的表达(P<0.05)。结论：猪ADSCs外泌体可以促进ADSCs向NSCs分化，研究结果为进一步探索干细胞外泌体对NSCs诱导的影响提供参考。

• 单位
  青岛农业大学