一种新的沙蚕纤溶酶的纯化、活性鉴定及部分分子特性

作者:张云龙; 洪敏; 王艳萍; 石立红; 李奇; 黄浩刚
来源:吉林大学学报(医学版), 2007, (02): 301-305.
DOI:10.13481/j.1671-587x.2007.02.042

摘要

目的:从沙蚕Nereis virens的体腔液中纯化、鉴定出一种新的纤溶酶,并对其进行分子表征。方法:运用离子交换层析、凝胶过滤层析等常规色谱方法纯化蛋白酶,采用纤维蛋白板检测法鉴定纤溶活性及活性分布曲线,利用2D-电泳方法检测此纤溶酶的表观分子量和等电点,并检测多种蛋白酶抑制剂对其酶活性的影响,以确定此蛋白酶的类型。结果:获取一种新的具有极强纤维蛋白水解活性的单链蛋白酶,其相对分子质量为29000,等电点为4.5,其蛋白水解活性在pH7.8和45℃时表现为最高,并能被二异丙基氟磷酸(DFP)和甲苯磺酚氟(PMSF)完全性抑制,确证其为一种典型的丝氨酸内肽酶。结论:Nereis virens的体腔液中存在一种纤溶活性极强的单链丝氨酸内肽酶,该纤溶酶对预防和治疗血栓性疾病具有一定的药用价值。

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