重组质粒pIRESEgr-IFNγ的构建及其在Lewis肺癌细胞中的辐射诱导表达

作者：**; 孙婷; 龚平生; 李修义; 龚守良

来源：吉林大学学报(医学版), 2007, 33(5): 790-793.

DOI：10.3969/j.issn.1671-587X.2007.05.004

• Egr-1
• 干扰素Ⅱ型
• 癌
• Lewis肺/治疗
• X射线

目的:构建重组真核表达质粒pIRESEgr-IFNγ并检测其在体外培养的Lewis肺癌细胞中的辐射诱导表达.方法:利用基因重组技术构建含Egr-1启动子的IFNγ表达质粒,脂质体介导体外转染Lewis肺癌细胞,酶联免疫吸附法(ELISA)检测0、2、5和10 Gy X射线诱导IFNγ表达的量效和时程关系.结果:酶切鉴定证实,Egr-1启动子和IFNγ基因正确插入真核表达载体pIRES1neo;2、5和10 Gy X射线照射转染该重组质粒的Lewis肺癌细胞,上清中IFNγ表达量明显高于假照组(P＜0.001),其中5 Gy照射后表达量最高,为假照组的4.39倍.5 Gy照射后2、6、12和36 h上清中IFNγ表达量逐渐增加(P＜0.001),照射后36 h表达量为照射前的6.27倍.结论:成功构建了真核表达质粒pIRESEgr-IFNγ,该质粒具有辐射诱导基因表达增强特性.

• 单位
  公共卫生学院; 基础医学院; 吉林大学; 生物化学教研室