秋葵总黄酮通过抑制炎症反应对糖尿病小鼠的心脏保护作用

作者：张梦宇; 于万德^*

来源：医学研究生学报, 2022, 35(04): 359-366.

DOI：10.16571/j.cnki.1008-8199.2022.04.005

• 总黄酮
• 秋葵
• 糖尿病心肌病
• 激活核因子κB
• 白细胞介素-1
• 白细胞介素-6
• 肿瘤坏死因子-α

目的 秋葵中提取的总黄酮(TFA)具有抗氧化、抑制纤维化等作用，心肌细胞在长期高糖刺激下出现过度的氧化应激，产生并释放大量的炎症因子，导致糖尿病心肌病(DCM)。文章将探讨TFA对DCM的影响及其相关机制。方法 将4周龄C57BL/6雄性小鼠分成4组：对照组、TFA组、糖尿病心肌病组(STZ组)及糖尿病心肌病+TFA组(STZ+TFA组)。利用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)100 mg/kg构建DCM模型，STZ+TFA组在STZ注射后每日喂食300 mg/kg TFA。通过血清生化检测、心脏超声及心脏活检评估各组小鼠的生理状况，并应用Western Blot与qPCR法分别比较激活核因子κB(NF-κB)及炎症因子的mRNA表达水平。同时，将H9C2株心肌细胞分为6组：低糖对照组、低糖TFA组、高糖组(HG组)、高糖+TFA组(HG+TFA组)、高糖+p65过表达组(HG+pCNDA-p65组)及高糖+TFA+p65过表达组(HG+TFA+pCNDA-p65组),利用正常的DMEM培养基内加D-葡萄糖，配置成含葡萄糖浓度为33 mmol/L的高糖培养基，pCDNA-p65转染H9C2株心肌细胞过表达p65。通过细胞免疫荧光实验对比细胞NF-κB入核水平，应用qPCR法检测细胞内IL-1、IL-6、TNF-α水平。结果 16周时STZ+TFA组心脏质量/体重(4.73±0.29)较STZ组(5.65±0.35)明显降低(P<0.05),血糖有下降趋势，但差异无统计学意义(P>0.05),对照组、TFA组、STZ组和STZ+TFA组心率差异无统计学意义(P>0.05);心超结果显示TFA明显改善糖尿病心肌病小鼠的左室扩大以及左室的收缩及舒张功能(P<0.05);HE染色与Masson染色显示TFA抑制糖尿病心肌病小鼠的心肌重构并降低心肌纤维化水平；并且给予TFA后，小鼠组织中的NF-κB、IL-1、IL-6、TNF-α水平明显下调(P<0.01)。在细胞水平，TFA预处理的心肌细胞予高糖环境刺激后，NF-κB入核水平减少并且细胞内IL-1、IL-6、TNF-α水平下调(P<0.01);过表达心肌细胞内的NF-κB后，TFA对于由高糖引起的高水平IL-1、IL-6、TNF-α不起作用。结论 TFA通过抑制NF-κB入核下调IL-1、IL-6、TNF-α水平，改善糖尿病心肌病。

• 单位
  南京医科大学