川藏香茶菜丙素抑制NLRP3炎症小体活化并缓解小鼠脓毒性休克

作者：曹海若; 张玮; 李明远; 杨燕青; 李玉云^*

来源：南方医科大学学报, 2023, 43(09): 1476-1484.

• 川藏香茶菜丙素
• NLRP3炎症小体
• 脓毒性休克
• 川藏香茶菜

目的 探究中草药提取物川藏香茶菜丙素（Iso C）对NLRP3炎症小体活化的影响以及对脂多糖（LPS）诱导的小鼠脓毒性休克是否具有缓解作用。方法 体外实验：利用LPS预刺激小鼠骨髓来源巨噬细胞（BMDM）以及人急性单核细胞白血病（THP-1）细胞系。通过加入多种NLRP3炎症小体激动剂活化经典NLRP3炎症小体。利用胞内转染LPS活化非经典NLRP3炎症小体。利用转染聚脱氧腺苷酸（poly A:T）活化AIM2炎症小体。通过蛋白质印迹法（Western blot）检测NLRP3炎症小体活化产物caspase-1的剪切，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测上清中NLRP3依赖与非依赖的多种促炎细胞因子分泌情况。利用电感耦合等离子体发射光谱仪检测细胞内钾离子含量。体内实验：挑选SPF级C57BL/6J小鼠随机分为空白对照组（Control组），脓毒性休克组（LPS组），Iso C治疗组（LPS+Iso C组）。ELISA分析小鼠血清和腹腔灌洗液中促炎细胞因子白细胞介素1β(1L-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的分泌情况，并观察注射LPS后小鼠48 h内生存时间，绘制小鼠生存曲线。结果体外实验表明，在BMDM细胞中Iso C以剂量依赖的方式抑制多种激动剂引起的经典NLRP3炎症小体活化以及胞内转染LPS诱导非经典NLRP3炎症小体的活化（P<0.05）,Iso C对NLRP3炎症小体非依赖的促炎细胞因子TNF-α和IL-6的分泌无显著影响（P>0.05）。Iso C对AIM2炎症小体的活化无显著影响（P>0.05）。Iso C不影响NLRP3炎症小体活化上游信号钾离子外流（P>0.05）。在人THP-1细胞中Iso C抑制NLRP3炎症小体活化（P<0.05）。体内实验结果表明，与脓毒性休克组相比，Iso C治疗组小鼠血清和腹腔灌洗液中IL-1β的水平显著下降（P<0.05）且生存时间更长（P<0.05）。结论 中草药来源的Iso C可以特异性抑制NLRP3炎症小体的活化从而缓解小鼠脓毒性休克，是潜在的治疗炎症性疾病的小分子化合物。

• 单位
  蚌埠医学院; 蚌埠医学院第一附属医院