治疗性超声介导体外基因转染的参数优化

作者：陈智毅; 谢明星; 王新房; 吕清

来源：中国医学影像技术, 2008, 24(10): 1511-1514.

DOI：10.3321/j.issn:1003-3289.2008.10.008

• 超声检查，介入性
• 声孔效应
• 转染
• 基因传输
• 优化

目的探讨不同治疗性超声(TUS)参数对基因转染的作用,优化TUS参数以实现高效率的转染,减少对细胞活力和质粒完整性的影响。方法将质粒和Sono Vue微泡加入培养的Hela细胞后行超声辐照,改变超声强度、占空比以及辐照时间等参数,比较不同的TUS辐照策略对细胞活力及红色荧光蛋白(DsRed)表达效率的影响,以确定最佳辐照参数,并对质粒完整性进行分析。结果低超声强度(0.4 W/cm~2、1.0 W/cm~2)、低占空比(10%和20%)时,细胞存活率较高(>80%),辐照1 min和3 min之间的细胞活力差异不明显(P>0.05)。当增加超声强度(1.6 W/cm~2、2.2 W/cm~2)和占空比(50%)时,细胞活力显著下降(P<0.05)。当20%占空比,1.0 W/cm~2的TUS辐照3 min时,可实现最高的转染率。质粒DNA结构的完整性不受优化的TUS参数影响。结论TUS是一种有效的基因输送方法,优化的参数在无显著细胞死亡和DNA损伤的前提下增加转染,这种非侵袭性的基因转染方法可能是临床基因疗法的一种有用工具。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院