摘要
目的观察全反式维甲酸(ATRA)对HepG2/CD133+肝癌干细胞的分化效果。方法 ATRA以不同浓度(1×10-9~1×10-5 mol/L)加入到干细胞培养基,培养5d后,用流式细胞技术检测肝癌干细胞标志物CD133抗原表达变化,分别用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)法和Western blot法检测肝癌干细胞中胚胎干细胞标志物性别决定区Y框蛋白2(Sox2)、八聚体结合转录因子(Oct4)、永生基因(Nanog) mRNA及蛋白的表达,用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力水平的变化。结果 HepG2/CD133+细胞比例随着全反式维甲酸浓度升高而降低,从(90.81±0.48)%分别降低至(90.23±0.37)%、(89.77±0.41)%、(88.65±0.29)%、(84.92±0.35)%和(79.6±0.27)%;1×10-6 mol/L ATRA浓度Oct4 mRNA水平明显低于空白对照组(P=0.037),Sox2、Nanog组间比较差异无统计学意义(P=0.067、0. 229);3种标志物的蛋白表达水平均出现下降,其中Sox2和Nanog出现了显著的降低;细胞增殖活性在1、2、3、5 d出现略微的上升,并未出现显著性升高(P=0.562、0.318、0.863、0.444)。结论肝癌干细胞在全反式维甲酸处理后,干细胞特性显著降低。全反式维甲酸在一定浓度范围内的不同浓度下可诱导分化肝癌干细胞,浓度越高,分化作用越强。
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单位昆明市第一人民医院; 武汉市中心医院; 华中科技大学同济医学院