心脏干细胞分离培养及其增殖与迁移的机制

作者：侯波; 朱先云; 王学坤

来源：中国组织工程研究, 2016, 20(41): 6190-6196.

• 组织工程
• 干细胞
• 细胞增殖
• 培养
• 心脏干细胞
• 心脏
• 细胞稳态
• 微环境
• 作用机制

背景:体外环境下进行心脏干细胞培养的过程中,生长微环境可能会对细胞的的增殖等产生一定的影响。目的:在体外环境下培养大鼠心脏干细胞,探讨心脏干细胞增殖、迁移的可能机制。方法:纳入SD大鼠10只,获得心肌组织块进行原代和传代培养。收集第3代心脏干细胞进行免疫荧光染色,进行干细胞鉴定,检测干细胞生长因子受体(c-kit)和CD45、CD90的表达。收集培养后的组织块,随机分为2份,一份用多聚甲醛进行固定,常规石蜡包埋后切片,进行苏木精-伊红染色、Masson染色以及细胞凋亡检测;另一份在培养基中添加Ed U标记增殖细胞,采用免疫荧光染色检测c-kit阳性细胞以及基质金属蛋白酶2,9及转化生长因子β1等表达。结果与结论:(1)细胞鉴定结果:心肌组织培养7-10 d后有明亮的圆形细胞长出,细胞贴壁后呈梭状,生长、增殖能力旺盛。免疫荧光染色可观察到大量细胞呈c-kit、CD45阳性表达,CD90阴性表达;(2)细胞凋亡情况:培养的组织块切片后染色见大量新生细胞生长的同时伴随心肌细胞的凋亡;(3)免疫荧光染色结果:经EdU标记后阳性细胞分布于心肌间隙,基质金属蛋白酶2,9及转化生长因子β1少量表达,但周围心肌组织上述3因子表达明显增多。(4)结果表明,心肌组织体外培养可获取心脏干细胞,伴随细胞增殖和迁移,其机制与基质金属蛋白酶2,9及转化生长因子β1的表达有关。

• 单位
  青岛市中心医院; 青岛市胶州中心医院