Foxp1基因CDS区的克隆及其在星形胶质细胞中的表达

作者：叶鑫; 杨娜娜; 龚劲雯; 李淑蓉; 苏炳银; 赵海霞

来源：成都医学院学报, 2022, 1-8.

• 原代星形胶质细胞
• Foxp1
• 编码区
• 克隆

目的 体外分离培养原代星形胶质细胞，在星形胶质细胞中克隆Foxp1基因编码区序列（CDS）区并过表达。方法 利用机械分离法获取小鼠原代星形胶质细胞；异硫氰酸胍法（TRIzol法）提取原代星形胶质细胞内总RNA 并逆转录为cDNA，克隆CDS区、测序；利用美国国家生物技术信息中心（NCBI）和SnapGene软件对测序结果与库内小鼠中四个 Foxp1转录本的CDS区进行对比；将星形胶质细胞中Foxp1基因的CDS克隆到表达载体上，并转染到HEK293T细胞内验证其表达。结果 体外成功分离培养原代星形胶质细胞，且纯度达95%及以上；克隆出星形胶质细胞内 Foxp1的CDS，较参考序列Foxp1转录本4的CDS，其在514/515处插入3个连续碱基AGC；将克隆有Foxp1基因 CDS区的表达载体转入HEK293T细胞内后可见在约106kD处有Foxp1蛋白表达。结论 成功分离培养原代星形胶质细胞并获取Foxp1新的CDS。

• 单位
  成都医学院