人源H3N2亚型猪流感病毒反向遗传操作技术平台的建立

作者：姚云; 张毅峰; 王帅勇; 虞凌雪; 朱世强; 王娟; 单同领; 周艳君; 童武; 郑浩; 李国新; 童光志; 于海^*

来源：中国动物传染病学报, 2022, 30(06): 13-18.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.2022.06.003

• RT-PCR
• 猪流感
• H3N2亚型
• 反向遗传操作技术

为了构建人源H3N2亚型猪流感病毒的反向遗传操作技术平台，利用RT-PCR扩增出流感病毒的8个基因片段，酶切后连接到双向转录表达载体p BD上，将8个重组质粒纯化后转染至293T细胞于54 h后收取上清液并接种MDCK细胞直至出现细胞病变，取上清液检测出有血凝活性。全基因序列测定结果表明，拯救毒株与野生毒株核苷酸序列比对结果一致，病毒拯救成功。人源H3N2亚型猪流感病毒的成功拯救为猪流感病毒的生物学特性、分子致病机制及疫苗研发奠定了基础。

• 单位
  中国农业科学院上海兽医研究所; 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心