沉默AFP表达对肝癌细胞侵袭转移的影响及机制

作者：苏纯洁; 何前进^*; 毛伟明; 张喜华; 岑红兵; 张松柏

来源：山东医药, 2019, 59(04): 44-47.

• 肝癌
• 甲胎蛋白
• 基质金属蛋白酶
• 细胞侵袭
• 细胞转移

目的研究沉默甲胎蛋白(AFP)表达对肝癌细胞侵袭和转移的影响,并探讨其相关机制。方法将处于对数生长期的Hep3B细胞随机分为Hep3B/shRNA-AFP组、Hep3B/shRNA-control组,消化后种于6孔板中,待生长至65%融合时,分别将AFP干扰的慢病毒载体和对照病毒载体,按照感染复数为30的比例滴加到细胞培养液中。感染16 h后,吸出含慢病毒颗粒的培养液,更换培养液,取继续培养5 d后的细胞。通过划痕实验、Transwell转移实验观察沉默AFP表达后Hep3B细胞的侵袭转移能力变化。real-time PCR法检测AFP对MMPs家族基因表达的影响。结果 Hep3B/sh-AFP组24 h后空白区域占原始划痕区域面积百分比为77. 1%±1. 5%,Hep3B/shR-NA-control组为51. 3%±1. 5%,两组比较,P <0. 05。Hep3B/sh-AFP组、Hep3B/shRNA-control组穿透滤膜的细胞数分别为(463±47)、(718±23)个/HP,与Hep3B/shRNA-control组相比,Hep3B/sh-AFP组穿透滤膜的细胞数减少(P <0. 05)。real-time PCR检测结果显示,Hep3B/sh-AFP组MMP2、MMP9、MMP11、MMP15、MMP17和MMP25的相对表达量低于Hep3B/shRNA-control组,两组比较,P均<0. 05。结论沉默AFP表达可降低肝癌细胞的侵袭和转移能力,其机制可能与抑制MMP2、MMP9、MMP11、MMP15、MMP17和MMP25表达有关。

• 单位
  黄冈市中心医院; 荆门市第一人民医院